Спикер: Наталья Сергеевна Линькова — cтарший эксперт-консультант Компании Peptides, Доктор биологических наук, профессор.
Актуальность. Патологические процессы, затрагивающие основные органы мочевыделительной системы, являются одной из наиболее частых причин снижения качества жизни людей трудоспособного возраста. Заболевания почек – глобальная проблема современного здравоохранения во всем мире, которая имеет большое медицинское и социальное значение. Распространенность заболеваний почек составляет от 10 до 20 %. Скрининг и выявление факторов риска неотделимы от мероприятий по первичной профилактике комплексному лечению болезней почек. Своевременная профилактика и комплексное лечение заболеваний почек во многих случаях позволяют избежать инвалидизации и летального исхода, сохранить высокое качество жизни у людей среднего и старшего возраста.
Для профилактики и в комплексной терапии патологии почек можно рекомендовать следующие пептидные и непептидные биорегуляторы: Пиелотакс, Ренефорт и Оваген.
Пиелотакс - комплекс полипептидоа, полученных из паренхимы почек молодых животных. Пиелотакс оказывает избирательное действие на клетки почек, нормализует их метаболизм и функции, регулирует работу мочевыделительной системы. Пиелотакс выпускается в форме биологически активной добавки к пище (БАД) - капсулы и капли под язык (лингвальная форма). При изучении острой токсичности на беспородных мышах-самцах показано, что однократное введение Пиелотакса животным в дозе, превышающей терапевтическую (рекомендованную для клинического применения), более чем в 5000 раз, не вызывает токсических реакций. Изучение подострой и хронической токсичности препарата на беспородных крысах-самцах и морских свинках свидетельствует об отсутствии побочных эффектов при длительном применении Пиелотакса в дозах, превышающих терапевтическую в 300 - 3000 раз. Пиелотакс не изменяет морфологический состав и биохимические показатели периферической крови морских свинок через 3 и 6 месяцев после начала введения [Хавинсон В.Х. и др., 2007].
Было проведено исследование эффективности Пиелотакса при подагрической нефропатии. В исследовании участвовали пациенты с подагрической нефропатией в возрасте 43-57 лет. Контрольная группа – 10 человек, получавших общепринятое лечение и исследуемая группа – 15 человек, применявших в дополнение к стандартной терапии 5 мг Пиелотакса в 2 мл физиологического раствора, внутримышечно, ежедневно в течение 10 дней. В 78% случаев под действием Пиелотакса выявлено улучшение самочувствия, нормализация сна, уменьшение частоты и интенсивности суставных болей, улучшение лабораторных показателей по анализам крови и мочи. Наблюдалась активация метаболизма почечных тканей с усилением секреторной функции почек [Хавинсон В.Х. и др., 2007].
Ренефорт - комплексный препарат, нефро- и онкопротектор, который улучшает растворимость камней и обладает противовоспалительным действием. В состав Ренефорта входят: экстракт шиповника и дигидрокверцетин, хвощ полевой, гибискус, розмарин, листья брусники, геспередин, коэнзим Q10.
Пиелотакс и Оваген (еще известен как регулятор функций печени) проявили себя как регуляторы клеточного обновления в тканях почек. Оценку влияния Пиелотакса и Овагена проводили в органотипической культуре ткани почек старых (24 месяца) крыс линии Wistar. Исследуемые группы: контроль – без добавления пептидов, 2 – добавление Пиелотакса в дозировке 20 нг/мл, 3 – добавление Овагена в дозировке 0,05 нг/мл. В культурах клеток почек методом иммуноцитохимии оценивали синтез белков пролиферации Ki67 (деление клеток) и апоптоза р53 (запрограммированной гибели клеток). Пиелотакс усиливает экспрессию белка Ki67, а также снижает экспрессию белка р53 в эксплантатах почек, полученных от молодых и старых животных. Оваген также стимулирует пролиферацию и снижает апоптоз клеток почки, однако в меньшей степени, чем Пиелотакс [Чалисова Н.И. и др., 2015].
Далее было изучено влияние Овагена на старение клеток почек в культуре, получены данные кривой клеточного роста. Исследование было проведено на первичной диссоциированной культуре клеток из ткани почек, полученной от молодых крыс линии Wistar. Для построения кривой клеточного роста клетки 14-го пассажа рассаживали на 24-луночный планшет в исходной концентрации 10 000 клеток на 1 мл среды. Затем число клеток подсчитывали в камере Горяева на 3-и, 5-е, 7-е, 10-е, 13-е сутки. Кривая клеточного роста - кривая, описывающая зависимость логарифма числа живых клеток от времени культивирования. В контрольных культурах клеток увеличение числа клеток наблюдался на 3-е и 5-е сутки, на 7-е сутки их численность стабилизировалась и к 10 - 13-м суткам число клеток резко снижалось. Оваген оказывал действие на ход кривой клеточного роста, достоверно повышая численность субпопуляции клеток почек с 3-х по 13-е сутки. При этом максимальный эффект Овагена наблюдался на 10-е и 13-е сутки, что указывает на замедление процесса клеточной гибели [Хавинсон В.Х. и др., 2014].
Исследование влияния Овагена на старение клеток почек в культуре (оценка синтеза белков р16, р21, р53 и cиртуина – 6) было проведено на первичной культуре клеток почек молодых (3 месячных) крыс линии Wistar. Для оценки синтеза белков «молодости» Сиртуина-6, «старения» и апоптоза (запрограммированной гибели клеток) р16, р21 и р53 в клетках почек был использован метод иммуноцитохимии. Контрольные клетки выращивали без добавления пептида. В экспериментальные культуры добавляли Оваген при каждом пересеве в концентрации 20 нг/мл. Оваген увеличивал синтез Сиртуина-6 в 1,6 и 3,3 раза в «молодых» и «старых» культурах клеток, соответственно, и уменьшал экспрессию следующих маркеров: p16 — в 2,8 и 1,8 раза, p21 — в 2,9 и 1,6 раза и p53 в 1,7 и 3,2 раза [Хавинсон В.Х. и др., 2014].
Было изучено нефропротекторное действие Овагена на моделях ишемически реперфузионного повреждения почек и токсической гентамициновой нефропатии у крыс. Исследование было проведено на 42 беспородных белых крысах. В первой части исследования животных разделили на 3 группы: 1 – контроль – ложнооперированные животные (выполняется хирургическое вмешательство без дальнейшего повреждения почек), 2 - моделирование ишемически реперфузионного повреждения почек, 3 - моделирование ишемически реперфузионного повреждения почек и введение Овагена в дозе 3 мкг/кг в течение 3 сут до моделирования патологии. Ишемию моделировали в асептических условиях под общей анестезией (этаминал натрия, 40 мг/кг) путем наложения зажима на каждую почечную ножку на 60 мин с последующей 24 часовой реперфузией, после чего в течение 2 ч собирали мочу в условиях индуцированного водного диуреза (энтеральное внутрижелудочное введение подогретой до 37 градусов питьевой воды в объеме 5% от массы тела). Во второй части исследования животных разделили на 3 группы: 1 – контроль, 2 - моделирование гентамициновой нефропатии (введение 4% раствора гентамицина сульфата в дозе 80 мг/кг однократно в течение 6 сут), 3 - моделирование гентамициновой нефропатиии и введение Овагена в дозе 3 мкг/кг через 40 мин после каждой инъекции гентамицина. Установлено, что Оваген обладает защитным действием по отношению к почечной ткани на модели ишемически реперфузионного повреждения и токсической гентамициновой нефропатии. Об этом свидетельствует восстановление экскреторной функции почек, улучшение энергообеспечения нефронов, ограничение свободнорадикальных процессов и повышение активности ферментов антиоксидантной защиты [Заморский И.И. и др., 2017].
Кроме того, были проведены исследования по изучению влияния Пиелотакса и Овагена на морфофункциональное состояние почек у старых крыс. Исследование выполнено на 35 нелинейных белых старых (20–24 мес) крысах. Животных разделили на 3 группы: 1 - контроль; 2 – введение Пиелотакса в дозе 300 мкг/кг в течение 10 дней внутрибрюшинно в виде водного раствора; 3 - введение Овагена в дозе 3 мкг/кг в течение 10 дней внутрибрюшинно в виде водного раствора. Оваген повышал диурез в 1,3 раза по сравнению с контролем, не влиял на концентрацию креатинина в плазме крови и скорость клубочковой фильтрации, но приводил к уменьшению реабсорбции воды на 2,9 %, что свидетельствует о канальцевом механизме увеличения диуреза. Под влиянием Овагена установлено увеличение в 1,3 раза экскреции ионов натрия и усиление дистального транспорта натрия в почках. Пиелотакс достоверно увеличивал диурез в 1,2 раза по сравнению с контролем на фоне тенденции к увеличению скорости клубочковой фильтрации и уменьшения реабсорбции воды. Обнаружено гипоазотемическое действие Пиелотакса, на что указывает уменьшение концентрации креатинина в плазме крови в 1,4 раза по сравнению с контролем. Пиелотакс достоверно уменьшал содержание белка в моче в 1,8 раза и его экскрецию в 1,5 раза по сравнению с контролем. Со стороны кислоторегулирующей функции почек под влиянием Пиелотакса выявлено увеличение рН мочи на 5% на фоне достоверного увеличения экскреции ионов аммония в 1,3 раза. Под влиянием Пиелотакса наблюдали усиление в 1,2 раза дистального транспорта ионов натрия. Таким образом, Пиелотакс и Оваген влияют на процессы канальцевого транспорта воды, белка и ионов в нефронах почек, а также проявляют слабое диуретическое действие [Заморский И.И. и др., 2018].
Было установлено, что Пиелотакс и Оваген восстанавливают функциональное состояние почек в модели цисплатиновой острой почечной недостаточности у крыс. В исследование было включено 42 беспородные молодые (3х месячные) крысы, которых разделили на следующие группы: 1 – контроль (интактные крысы), 2 - крысы с цисплатиновой острой почечной недостаточностью (ОПН), 3 – ОПН и введение Пиелотакса в дозе 300 мкг/кг внутрибрюшинно в течение 4 сут до и 3 сут после введения цисплатина 1 раз в день в утренние часы, 4 – ОПН и введение Овагена в дозе 3 мкг/кг кг внутрибрюшинно в течение 4 сут до и 3 сут после введения цисплатина 1 раз в день в утренние часы. Экспериментальную модель цисплатиновой ОПН у крыс вызывали путем однократного внутрибрюшинного введения цисплатина в дозе 6 мг/кг за 72 ч до выведения животных из эксперимента. Установлено, что введение Пиелотакса и Овагена оказывает восстанавливающее действие на функциональное состояние почек крыс при ОПН. Также эти пептиды нормализуют показатели экскреторной и ионорегулирующией функций почек. Наибольший нефропротекторный эффект в данном исследовании показал Оваген [Заморский И.И. и др., 2015].
Выводы
1. Пиелотакс показал высокую эффективность в клиническом исследовании у пациентов среднего возраста при подагрической нефропатии. В 78% случаев под действием Пиелотакса выявлено улучшение самочувствия, нормализация сна, уменьшение частоты и интенсивности суставных болей, улучшение лабораторных показателей по анализам крови и мочи. Под действием Пиелотакса наблюдалась активация метаболизма тканей почек и усиление их секреторной функции. Пиелотакс в 2,2 раза повышает синтез белка деления клеток почек (Ki67) и на 20% снижает синтез белка апоптоза р53 (клеточной гибели) в этих клетках. Таким образом, Пиелотакс стимулирует обновление клеток в ткани почек.
2. Оваген, также известный как гепатопротектор, показал свою эффективность как нефропротектор при старении и патологии почек различного генеза в экспериментах. Изучены молекулярные механизмы нефропротекторного действия Овагена при старении клеток почек. Установлено, что Оваген активирует рост клеток, снижая экспрессию белков «старения» и апоптоза р16, р21, р53 и повышая экспрессию белка «молодости» Сиртуина-6.
3. Показана эффективность Овагена и Пиелотакса в модели цисплатиновой почечной недостаточности у животных. Пиелотакс и Оваген нормализуют диурез, концентрацию креатинина в моче и его экскрецию, скорость клубочковой фильтрации, абсолютную реабсорбцию ионов натрия, снижали концентрацию белка в моче и его экскрецию, концентрацию ионов натрия и калия в моче и другие показатели при этой патологии почек.
4. Оваген оказывает нефропротекторное действие в экспериментальных моделях гентамициновой нефропатии и ишемически-реперфузионного повреждения почек у крыс. Нефропротекторное действие Овагена проявляется в предотвращении развития олигурии и азотемии, уменьшении протеинурии и экскреции натрия, антиоксидантном эффекте и нормализации энергетического обеспечения клеток почек.
Схема применения пептидных и непептидных биорегуляторов для профилактики ускоренного старения и заболеваний почек:
-
Пиелотакс – по 1 капсуле утром до еды
-
Ренефорт – по 1 капсуле утром и вечером до еды
-
Оваген - по 1 капсуле утром до еды
Длительность применения – 1 месяц, можно повторить через 6 месяцев.
Схема применения пептидных и непептидных биорегуляторов в комплексном лечении заболеваний почек:
-
Пиелотакс – по 2 капсулы утром до еды
-
Ренефорт – по 1 капсуле утром и вечером до еды
-
Оваген - по 2 капсулы утром до еды
Длительность применения – от 1 до 3х месяцев, при необходимости повторить через 1-2 месяца.
Литература
1. Заморский И.И., Щудрова Т.С., Зеленюк В.Г., Линькова Н.С., Ничик Т.Е., Хавинсон В.Х. Нефропротективное действие пептида EDL при остром повреждении почек различного генеза. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2017. Т. 163, № 3. С. 376-380. https://khavinson.info/assets/files/russ/2017-zamorskyi.pdf
2. Заморский И.И., Щудрова Т.С., Зеленюк В.Г., Линькова Н.С., Ничик Т.Е., Хавинсон В.Х. Влияние пептидов на морфофункциональное состояние почек у старых крыс. Успехи геронтологии. 2018. № 4. С.498-504. https://khavinson.info/assets/files/russ/2018-zamorskyi.pdf
3. Заморский И.И., Щудрова Т.С., Зеленюк В.Г., Линькова Н.С., Ничик Т.Е., Хавинсон В.Х. Пептиды восстанавливают функциональное состояние почек при цисплатиновой острой почечной недостаточности. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2015. Том 159. № 6. С. 708-712. https://khavinson.info/assets/files/pdf/2015-zamorskij.pdf
4. Хавинсон В.Х., Малинин В.В., Рыжак Г.А. Патент РФ RU 2302868 C1. Средство, нормализующее функции почек, и способ его получения. 2007. https://patents.s3.yandex.net/RU2302868C1_20070720.pdf
5. Хавинсон В.Х., Тарновская С.И., Линькова Н.С., ПоляковаВ.О., Дурнова А.О., Ничик Т.Е., Кветной И.М., Дьяконов М.М, Якуцени П.П. Трипептиды замедляют процесс старения в культурах клеток почек. Успехи геронтологии. 2014. Т. 27. № 4. С. 651–656. http://www.gersociety.ru/netcat_files/userfiles/10/AG_2014-27-04.pdf ссылка на номер журнала с этой статьей
6. Чалисова Н.И., Линькова Н.С., Ничик Т.Е., Рыжак А.П., Дудков А.В., Рыжак Г.А. Пептидная регуляция процессов клеточного обновления в культурах тканей почек молодых и старых животных. Клеточные технологии в биологии и медицине. 2015. № 1. С. 124-127. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26033601/ ссылка на резюме статьи, полный текст прилагаю